Abstract: Vaccine plasmids encode antigenic proteins of patho-
gens and must be delivered in mammalian cells. To this end attenuated
intracellular bacteria can be used. In this work plasmid pBBR4-CMV-
Ggp-SV40+ was used, it contains the gene of the main rabid antigen, G
glycoprotein (Ggp), and cytomegalovirus (CMV) eukaryotic expression
promoter, the Ggp induces a protective response against infection. The B.
abortus S19 and RB51 attenuated strains as well as B. canis virB10 em-
ployed for bovine and canine vaccination against Brucellosis were trans-
formed with this plasmid. These are intracellular strains and can be used
as vectors for rabies vaccine plasmid. The three strains were achieved
transformed by electroporation and were certified by polymerase chain
reaction (PCR) identifying Ggp gene. These transformed strains are a pro-
duct with potential application as vaccine against Brucellosis and Rabies.
+ Key words: G glycoprotein, attenuated vaccine strains, vaccine plasmid,
brucella and bacterial transformation.
Introducción
Los plásmidos vacunales son moléculas de ADN construidas artificial-
mente con un propósito específico, estructuralmente está constituidas de
dos secciones; una sección funcional y una sección para producción; la
sección funcional contiene las secuencias que él plásmido requiere para
cumplir con el fin para el que se construyó, mientras la sección de pro-
ducción incluye regiones que ayudan a la propagación del plásmido en las
células (generalmente bacterias), que servirán para construirlo y poste-
riormente producirlo (Figura 1).
En la sección funcional de un plásmido vacunal, se encuentran genes
que codifican para las proteínas más inmunogénicas de algún agente in-
feccioso; además, estos genes están regulados por promotores que inducen
fuertemente la expresión de la proteína en células de mamífero, entre los
más utilizados están el promotor de Citomegalovirus (CMV) y el del virus
40 de simio (SV40). Después del gen se ubican secuencias estabilizadoras
del proceso de transcripción de la proteína codificada. La sección de pro-
ducción incluye secuencias, como el origen de replicación para bacterias,
el cual ayuda a que el plásmido se propague en la progenie bacteriana una
vez que la primera célula lo capta, un gen de selección que sirve para re-
cuperar las bacterias que recibieron el plásmido (Gurunathan, Klinman y
Seder, 2000).
La generación de un plásmido vacunal requiere un proceso que contem-
pla desde la concepción de la idea has