Valorização do subproduto “ cartilagem do osso da quilha ” através da otimização da extração de colágeno
Tabela 2 . Planejamento fatorial 2 ² para otimização do processo de extração de colágeno na cartilagem do osso da quilha do frango .
Tratamento x 1 – Pepsina (%) x 2
– Temperatura da hidrólise (º C )
Rendimento do colágeno
1 ( -1 ) 0,1 ( -1 ) 4 - 2 (+ 1 ) 1,0 ( -1 ) 4 - 3 ( -1 ) 0,1 (+ 1 ) 30 - 4 (+ 1 ) 1,0 (+ 1 ) 30 - 5 ( 0 ) 0,55 ( 0 ) 17 - 6 ( 0 ) 0,55 ( 0 ) 17 - 7 ( 0 ) 0,55 ( 0 ) 17 -
Valores codificados e reais do planejamento experimental .
A cartilagem do osso da quilha de frango foi submetida à extração ( Fig . 3 ) com ácido orgânico e enzima pepsina ( Nuclear Ltda , Diadema , São Paulo ), segundo metodologia adaptada de Simões et al . ( 2014 ),
Araújo ( 2017 ). O ácido utilizado foi aquele que resultou em maior rendimento de colágeno , segundo descrição do item de avaliação do pré-tratamento com ácido orgânico .
Figura 3 . Otimização do processo de extração ácido-enzimática do colágeno da cartilagem do osso da quilha de frangos ( Fonte : Araújo , 2017 ).
A cartilagem previamente triturada foi imersa numa solução com ácido acético ( 0,5 mol / L ) na proporção de 1:10 ( p / v ), por 24 horas , em temperatura de 18 º C . Após esse tempo , o material foi submetido à homogeneização em turrax por 10 minutos a 5000 xG . À mistura obtida foi adicionado percentuais variáveis de pepsina ( 0,1 %, 0,55 % e 1 %) em diferentes temperaturas de extração ( 4 ° C , 17 ° C e 30 º C ).
Para interromper o processo de hidrólise , o pH da mistura foi elevado para 7 com solução de NaOH 1,0 mol / L , e esta foi centrifugada a 10000 xG por 30 minutos .
Após desprezar o precipitado , o sobrenadante obtido foi precipitado com NaCl até 3,0 mol / L e novamente a mistura foi centrifugada a 10000 xG por 30 minutos . O precipitado obtido foi dialisado por 72 horas em solução de ácido acético 0,5 mol / L , com troca diária dessa solução , em uma proporção de material a ser dialisado e solução de ácido acético de 1:50 ( p / v ). O precipitado dialisado foi liofilizado e o material obtido , o isolado à base de colágeno , foi submetido à análise de hidroxiprolina a fim de se determinar o rendimento em colágeno .
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