Glossário
Alvo terapêutico molécula específica, como uma proteína, ou um mecanismo biológico que pode ser modulado por medicamentos ou terapias para tratar uma doença ou condição médica.
Biomarcador características ou marcadores biológicos que podem ser medidos e avaliados objetivamente e que fornecem informações sobre um estado específico que pode ser fisiológico ou patológico.
Epigenética Estudo das mudanças hereditárias na expressão dos genes que não envolvem alterações na sequência de bases do ADN.
Expressão genética processo pelo qual a informação contida no ADN é transcrita para ARN mensageiro( mARN) ou ARN funcional [ por exemplo, ARN de transferência( tARN) ou ARN. ribossomal( rARN)]. O mARN, não sendo um ARN funcional, pode ser posteriormente traduzido numa proteína.
TERT( do inglês Telomerase Reverse Transcriptase) subunidade catalítica da telomerase, que funciona como uma transcriptase reversa, ou seja, a partir do seu próprio ARN molde adiciona repetições de nucleótidos de ADN às extremidades dos cromossomas( os telómeros).
Hipermetilado mais metilado do que o valor considerado normal.
O cancro da mama( CM) é uma doença complexa e heterogénea, representando um grande desafio para a medicina devido às suas variadas apresentações clínicas e respostas terapêuticas, pelo que a descoberta de novos biomarcadores e alvos terapêuticos são bastante valorizados. Biomarcadores epigenéticos são indicadores que refletem alterações na expressão genética que não envolvem mudanças na sequência do ADN( como mutações), mas sim modificações na estrutura e / ou na acessibilidade do ADN, como a metilação do ADN. THOR( do inglês TERT Hypermethylated Oncological Region) é a designação dada a uma região do gene TERT( do inglês Telomerase Reverse Transcriptase) que codifica a subunidade catalítica da telomerase, uma enzima cuja reativação leva ao desenvolvimento de cancro porque permite a proliferação celular ilimitada- uma característica fundamental do crescimento tumoral. Sabendo que a THOR está frequentemente hipermetilada em células cancerígenas de vários tipos de cancro e sendo o estado de metilação da THOR em CM uma incógnita, desenvolvemos um estudo tendo como objetivo explorar o potencial da THOR como biomarcador epigenético e avaliar o seu impacto funcional na regulação do gene TERT em CM.
A THOR está hipermetilada em tecido tumoral de CM quando comparado com tecido normal
Através do tratamento com bissulfito e pirosequenciação verificou-se que a região THOR está significativamente mais metilada em tecidos de tumores malignos de mama quando comparados com tecidos de mama normais. Esta hipermetilação permite diferenciar tecido tumoral de tecido normal desde os estágios iniciais da doença e constitui, portanto, um biomarcador precoce do CM.
Impacto Funcional da Desmetilação de THOR
Utilizando a tecnologia CRISPR-dCas9, conseguimos desmetilar a região THOR numa linha celular de CM( Fig. 1). A desmetilação de THOR resultou numa redução
Figura 1. As células de cancro da mama com o THOR desmetilado originaram tumores mais pequenos em ratinhos. Células de CM com o THOR metilado ou desmetilado por CRISPRdCAC9 foram injetadas em ratinhos para observar se proliferam e originam tumores ao longo do tempo. As células de CM desmetiladas resultaram em tumores mais pequenos e sem características histológicas cancerígenas( células bem individualizadas, citoplasma mais claro), como representado na coloração com hematoxilina-eosina, ampliação 20x.
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