Citometria de fluxo técnica de análise de partículas presentes em meio líquido num fluxo que permite analisar em termos de tamanho, forma, complexidade e fluorescência cada partícula individualmente, à medida que passam por um feixe de luz( laser). A luz dispersa pelas partículas, assim como a fluorescência emitida, é captada pelo sistema ótico / eletrónico do aparelho constituído por vários filtros e detetores.
Pró-inflamatório promoção ou intensificação da inflamação no organismo, contribuindo para a ativação e recrutamento de células do sistema imunitário para combater inflamação e ajudar a reparar tecidos danificados.
Citocinas ou citoquinas proteínas produzidas por vários tipos de células, maioritariamente células imunitárias( i. e. monócitos, macrófagos, linfócitos), e capazes de ativar, mediar ou regular a resposta imune. As citocinas podem ter um efeito anti-inflamatório( i. e. IL-4, IL-10, IL-13) ou inflamatório( i. e. IL-1ꞵ, IL- 6, TNF-α).
NFκB – Factor nuclear kappa B é um complexo proteico que funciona como fator de transcrição encontrado em quase todo o tipo de células, estando envolvido na resposta celular a estímulos como por exemplo as citocinas. Desempenha um papel fundamental na regulação da resposta imune.
Expressão genética o termo“ expressão genética” é utilizado frequentemente como sinónimo de quantificação do RNA mensageiro que é responsável pela síntese de uma proteína. Através desta análise é possível saber se uma proteína está a ser expressa na célula e em que quantidade, numa determinada condição.
Figura 2. Propriedades anti-inflamatórias das nanopartículas carregadas com GRP( FCNG) em macrófagos humanos, determinada através da expressão genética relativa dos marcadores inflamatórios IL-1β, IL-6 e NFκB. Controlo sem estímulo inflamatório, macrófagos aos quais não foram adicionadas nanopartículas nem sujeitos a estímulo inflamatório; Controlo com estímulo inflamatório, macrófagos não tratadas com nanopartículas, mas expostos ao estímulo inflamatório durante 24h; FCN e estímulo inflamatório, células tratadas por 24h com nanopartículas idênticas às FCNG, mas que não contêm GRP( partículas FCN) e expostas ao estímulo inflamatório por 24h – nesta condição a diminuição na expressão dos marcadores inflamatórios nas células deve-se provavelmente à ação anti-inflamatória do quitosano; FCNG e estímulo inflamatório, macrófagos tratados com FCNG por 24h e expostas a estímulo inflamatório por 24h – nesta condição a ação anti-inflamatória das partículas dever-seá ao quitosano em conjunto com a GRP. Como se pode verificar, a adição de FCNG resulta numa diminuição da expressão dos marcadores inflamatórios para valores mais próximos da situação controlo, sem estímulo inflamatório. Os asteriscos indicam diferenças estatísticas significativas, logo, os grupos comparados são significativamente diferentes, p≤0.01(**), p≤0.001(***) e p≤0.0001(****).
Conclusões
Neste trabalho descreveu-se uma nova formulação de nanopartículas de quitosano e tripolifosfato de sódio, contendo GRP, com características morfológicas e físico-químicas favoráveis à sua aplicação biomédica. Verificouse que estas partículas têm a capacidade de diminuir a resposta inflamatória em diferentes modelos celulares representativos de várias doenças inflamatórias crónicas, demonstrando o seu potencial terapêutico como novo anti-inflamatório.
Artigo original
Viegas CSB, Araújo N, Carreira J, Pontes JF, Macedo AL, Vinhas M, Moreira AS, Faria TQ, Grenha A, de Matos AA, Schurgers L, Vermeer C, Simes DC. Nanoencapsulation of Gla-Rich Protein( GRP) as a Novel Approach to Target Inflammation. International Journal of Molecular Sciences( 2022) 23, 4813. https:// doi. org / 10.3390 / ijms23094813
Biografia dos Autores
Dina Simes, Professora auxiliar na UAlg, Doutorada em Química especialidade em Bioquímica. Líder do grupo de investigação Bioquímica Funcional e Proteómica( FBP), do CCMAR-UAlg. CEO na empresa GenoGla Diagnostics.
Carla Viegas, Licenciada em Bioquímica pela Universidade do Algarve( UAlg), Doutorada em Bioquímica, especialidade em Biologia Molecular e Celular( UAlg), e investigadora auxiliar do CCMAR no grupo FBP. COO na empresa GenoGla Diagnostics.
Joana Carreira, Licenciada em Biologia pela Universidade de Lisboa, Mestre em Investigação Biomédica pela Universidade de Coimbra e técnica de investigação no grupo FBP do CCMAR- UAlg.
Inês Baía, Licenciada em Biologia pela Universidade de Lisboa, Mestre em Genética Molecular e Biomedicina pela Universidade NOVA de Lisboa e bolseira de investigação no grupo FBP do CCMAR-UAlg.
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