Ossos endocondrais ossos que se desenvolvem a partir de um modelo cartilagíneo préformado, através de um processo chamado ossificação endocondral. Este tipo de ossificação ocorre sobretudo em ossos longos e é crucial para o desenvolvimento esquelético de vertebrados, bem como para o crescimento pós-natal.
Cardiomiócitos células musculares especializadas do miocárdio( músculo do coração), responsáveis pela contração rítmica e coordenada que permite a bombagem do sangue pelo sistema cardiovascular.
Expressão génica processo em que informação contida num gene é utilizada para formar um produto génico funcional, tal como RNA ou proteínas através de dois mecanismos distintos: a transcrição, em que o DNA é convertido em RNA, e a tradução, que consiste na conversão de RNA em proteínas.
Fator de transcrição proteína que se liga a sequências específicas de DNA( elementos reguladores) para controlar a transcrição de genes, promovendo ou inibindo a síntese de RNA a partir do DNA.
Osteoblastogénese processo de formação de osteoblastos, as células responsáveis pela síntese da matriz óssea e pela mineralização do osso. Este processo decorre a partir da diferenciação de células estaminais mesenquimatosas, sendo essencial para o desenvol-vimento, crescimento, manutenção e regeneração do tecido ósseo.
Neurogénese processo biológico através do qual novos neurónios são gerados a partir de células estaminais neurais ou progenitoras neurais. Este processo é essencial durante o desenvolvimento embrionário do sistema nervoso, mas também ocorre, de forma limitada, em algumas regiões do cérebro adulto. de função de Mef2ca e Mef2cb no desenvolvimento das larvas foi analisada por imagens in vivo obtidas sequencialmente ao longo do desenvolvimento de várias larvas individuais. Observámos o desenvolvimento de edema cardíaco que resultou num inchaço da porção anterior do corpo e deformação do espécime com consequente imobilização( Fig. 1). A rutura do edema e consequente paragem cardíaca ocorreu aos 6 dias após a fertilização( dpf), levando à morte do peixe.
Figura 1. Evolução fenotípica de larvas mutantes para mef2ca b1086 / b1086; mef2cb fh288 / fh288 com três, quatro, cinco e seis dias após a fertilização( dpf). As imagens foram
obtidas em diferentes momentos do desenvolvimento, mostrando um aumento no edema cardíaco, com uma consequente deformação geral que leva à completa imobilização do animal. Escala: 600 µ m.
Os mutantes duplos homozigóticos mostram um fenótipo craniofacial grave com alterações nas estruturas cartilagíneas e ósseas
Larvas homozigóticas portadoras de mutações para ambos os co-ortólogos do mef2c mostraram um fenótipo de cartilagem grave, conforme revelado pela coloração de azul de alcian, consistindo num desarranjo severo das estruturas craniofaciais quando comparados com larvas mutantes simples de mef2ca( mef2ca b1086 / b1086) e larvas selvagens nos mesmos estadios de desenvolvimento( Fig. 2). Todas as estruturas cartilagíneas, como por exemplo os arcos branquiais, mostraram um tamanho reduzido. A cartilagem de Meckel( uma estrutura cartilaginosa que desempenha um papel fundamental no desenvolvimento da mandíbula nos vertebrados) foi deslocada ventralmente, originando uma boca não funcional( Fig. 2).
Os peixe-zebra mutantes para mef2c apresentaram expressão alterada de marcadores de desenvolvimento esquelético e neuronal
Para avaliar se a perda de função de Mef2c em peixe-zebra afeta o desenvolvimento esquelético e neuronal, a expressão de genes marcadores foi analisada por PCR quantitativo( qPCR) em mutantes homozigóticos simples de mef2ca, em mutantes homozigóticos simples de mef2cb, em mutantes duplos para mef2ca e mef2cb e em larvas selvagens. Relativamente aos marcadores de cartilagem analisados, estes foram encontrados com expressão alterada nas diferentes linhas mutantes de mef2c analisadas, em comparação com as larvas selvagens. Relativamente aos marcadores de desenvolvimento neuronal normal, analisámos a expressão dos genes mecp2
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