Test Drive Analiza salivarne alfa amilaze | Page 10

Sa druge strane, smanjenu aktivnost ovog enzima viđamo kod: akutnog pankreatitisa sa brzom nekrozom, hepatitisa, teških opekotina, toksemija u trudnoći, teške tireotoksikoze, trovanja barbituratima i arsenom, adrenokortikalnog stresa i rekonvalescencije od pankreatitisa. Stoga je veoma značajno i analiziranje izoenzima amilaze,kako bi se utvrdilo iz kog tkiva potiče aktivnost. U humanom serumu se nalaze dva glavna izoenzima, i to oblik P koji potiče iz pankreasa i oblik S koji potiče iz salivarnih i drugih tkiva. Manji izoenzimi koji se nalaze u serumu predstavljaju fenotipske oblike ili posttranslacione modifikacije jednog od dva glavna izoenzima. Za određivanje koncentracije katalitičke aktivnosti amilaze postoje preko 200 različitih metoda.One se dijele na viskozimetrijske,turbidimetrijske i nefelometrijske,jodometrijske,saharogene,hromolitičke i fluorescentne metode. Danas se uglavnom koriste saharogene ,kao i neke hromolitičke metode. Kod saharogenih metoda ,glukoza koja se oslobađa iz supstrata određuje se enzimski pomoću heksokinaze,glukoza oksidaze ili glukozo-6-fosfat dehidrogenaze. Hromolitičke metode se zasnivaju na oslobađanju hromogena koji je vezan za nerastvorljivi polisaharid. Izoenzimi alfa amilaze mogu da se analiziraju elektroforetski,izoelektričnim fokusiranjem,hromatografijom na koloni i selektivnom inhibicijom izoenzima. Nakon elektroforetskog rastavljanja izoenzimi mogu da se otkriju na različite načine, i to pomoću reakcija koje se primjenjuju za kvantitativno određivanje aktivnosti amilaze. Izražavanje rezultata analize za alfa amilazu,zavisi od mnogih faktora ,a pre svega od izabrane analitičke metode. Najčešće korištena analitička metoda je u laboratoriji je : a) kolorimetrijska metoda za određivanje