Seleção e caracterização de estirpes de rizóbios para inoculação de feijão-caupi
mistura de vermiculita e areia (na proporção
de 2:1), sendo todo o conjunto esterilizado
em autoclave a 121°C por 90 minutos antes
do plantio (Figura 1). E os vasos foram
lavados e deixados em imersão em solução
de hipoclorito de sódio por 72 horas.
Figura 1. Condução do experimento em casa de vegetação (A,B,C,D).
A
B
C
Após, foi adicionada na parte inferior,
solução nutritiva (SARRUGE, 1975) sem
nitrogênio, pH 6,0 e esterilizada em autoclave
a 121°C por 20 minutos. Após o plantio, os
vasos foram inoculados com uma alíquota de
10 mL da suspensão de cada amostra de solo
em solução salina (NaCl 0,85%) esterilizada,
sendo utilizadas 3 repetições para cada
amostra de solo. Também foi utilizado 2
tratamentos como controle, sendo um com
solução nutritiva contendo nitrogênio e
sem inoculação, e outra sem inoculação e
sem nitrogênio toda a solução utilizada em
todos os tratamentos durante o experimento
foram anteriormente autoclavada a 121ºC por
20min para evitar contaminação. Ao total
foram cinco tratamentos com três repetições
cada e duas plantas por vaso.
Aos quatorze dias de crescimento,
foi realizado o desbaste deixando-se duas
100
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D
plântulas por vaso. A solução nutritiva
dos vasos foi completada a cada três dias
utilizando-se solução nutritiva (SARRUGE,
1975) sem nitrogênio, pH 6,0 e esterilizada
em autoclave a 121°C por 20 minutos,
intercalada com a adição de água destilada
esterilizada.
Após 40 dias da inoculação, foi
avaliada
a
nodulação,
considerando-
se tamanho e coloração dos nódulos, e
coletando-se os nódulos das plantas para o
isolamento dos rizóbios no laboratório.
O isolamento dos rizóbios foi
executado a partir dos nódulos radiculares
de Vigna unguiculata que foram obtidos das
plantas inoculadas com suspensão de solo,
cultivadas na casa de vegetação.
No laboratório, os nódulos foram
previamente desinfestados por lavagens