Série Iniciados Vol. 23 | Page 99

Seleção e caracterização de estirpes de rizóbios para inoculação de feijão-caupi mistura de vermiculita e areia (na proporção de 2:1), sendo todo o conjunto esterilizado em autoclave a 121°C por 90 minutos antes do plantio (Figura 1). E os vasos foram lavados e deixados em imersão em solução de hipoclorito de sódio por 72 horas. Figura 1. Condução do experimento em casa de vegetação (A,B,C,D). A B C Após, foi adicionada na parte inferior, solução nutritiva (SARRUGE, 1975) sem nitrogênio, pH 6,0 e esterilizada em autoclave a 121°C por 20 minutos. Após o plantio, os vasos foram inoculados com uma alíquota de 10 mL da suspensão de cada amostra de solo em solução salina (NaCl 0,85%) esterilizada, sendo utilizadas 3 repetições para cada amostra de solo. Também foi utilizado 2 tratamentos como controle, sendo um com solução nutritiva contendo nitrogênio e sem inoculação, e outra sem inoculação e sem nitrogênio toda a solução utilizada em todos os tratamentos durante o experimento foram anteriormente autoclavada a 121ºC por 20min para evitar contaminação. Ao total foram cinco tratamentos com três repetições cada e duas plantas por vaso. Aos quatorze dias de crescimento, foi realizado o desbaste deixando-se duas 100 Série Iniciados v. 23 D plântulas por vaso. A solução nutritiva dos vasos foi completada a cada três dias utilizando-se solução nutritiva (SARRUGE, 1975) sem nitrogênio, pH 6,0 e esterilizada em autoclave a 121°C por 20 minutos, intercalada com a adição de água destilada esterilizada. Após 40 dias da inoculação, foi avaliada a nodulação, considerando- se tamanho e coloração dos nódulos, e coletando-se os nódulos das plantas para o isolamento dos rizóbios no laboratório. O isolamento dos rizóbios foi executado a partir dos nódulos radiculares de Vigna unguiculata que foram obtidos das plantas inoculadas com suspensão de solo, cultivadas na casa de vegetação. No laboratório, os nódulos foram previamente desinfestados por lavagens