Kit para decorionação de embriões de peixe-zebra (Danio rerio)
utilizando peptidases do látex de Calotropis procera
Íris Flávia de Sousa Gonçalves 1
Davi Felipe Farias 2
Resumo
O peixe-zebra (Danio rerio) é amplamente utilizado como organismo modelo para
estudos em diversas áreas da Ciência. Contudo, certas dificuldades têm limitado o uso desse
modelo, uma delas refere-se à presença da membrana externa que envolve o embrião,
o córion. Esta membrana impede que substâncias de alta massa molecular entrem em
contato com o embrião, o que dificulta a realização de testes de exposição de embriões a
macromoléculas. Diante disso, buscou-se desenvolver um kit enzimático para decorionação
(remoção do córion) de embriões, contendo peptidases cisteínicas do látex da espécie vegetal
Calotropis procera. A remoção do córion utilizando a Pronase® (controle positivo) foi efetiva,
mas apresentou baixa reprodutibilidade e alta taxa de mortalidade. As peptidases cisteínicas
do látex de C. procera não foram eficientes na decorionação. A principal explicação para esse
resultado é que o córion de embriões de peixe-zebra possivelmente não possui pontos de
clivagem para peptidases cisteínicas.
Palavras-chave: Decorionação. Embrião. Peixe-zebra. Peptidases cisteínicas. Calotropis
procera.
Apresentação
Este capítulo surgiu da vivência de
pesquisa no desenvolvimento do plano “Kit
para decorionação de embriões de peixe-
zebra (Danio rerio) utilizando peptidases
do látex de Calotropis procera” pertencente
ao projeto de Iniciação Tecnológica (IT)
intitulado “Produtos inovadores aplicados à
criação, manejo e pesquisa com peixe-zebra
(Danio rerio)”. Esse projeto foi construído
e orientado pelo Professor Dr. Davi Felipe
Farias no período correspondente a um ano
(2016-2017). A execução do referido plano
também contou com a valiosa colaboração
dos Professores Drs. Márcio Viana Ramos
e Cleverson Diniz Teixeira, ambos da
Universidade Federal do Ceará (Fortaleza-
CE), que cederam amostras de peptidases
do látex de C. procera, bem como tivemos a
imprescindível ajuda do Professor Dr. Ian
Porto Gurgel do Amaral, da Universidade
Federal da Paraíba (João Pessoa-PB) que
gentilmente cedeu os embriões utilizados
neste estudo.
A gênese deste projeto de iniciação
tecnológica
surgiu
da
vivência
das
dificuldades enfrentadas pelos próprios
autores durante as suas atividades de criação,
manejo e pesquisa com o peixe-zebra (Danio
rerio). Apesar da demanda crescente por esse
organismo modelo na pesquisa científica em
todo o mundo, ainda são poucos os centros
dedicados à produção desse teleósteo, bem
Título do Projeto de Pesquisa / Plano de Trabalho: Produtos inovadores aplicados à criação, manejo e pesquisa com
peixe-zebra (Danio rerio)/Kit para decorionação de embriões de peixe-zebra (Danio rerio) utilizando peptidases do
látex de Calotropis procera
¹Estudante de Iniciação Científica: Íris Flávia de Sousa Gonçalves (e-mail: [email protected])
Instituição de vínculo da bolsa: UFPB/CNPq (www.pro pesq.ufpb.br, e-mail: [email protected]).
²Orientador: Davi Felipe Farias (e-mail: [email protected], telefone: 83 3216-7633)
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Série Iniciados v. 23