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Amplificaciones de genes por RT-PCR
Tanto en animales, como vegetales, hongos, bacterias, virus, viroides y fitoplasmas, la utilización
de la reacción de cadena de la polimerasa PCR, permitió la amplificación de genes y el estudio de
variantes génicas y de genomas. Cualquier estrategia de análisis molecular para, por ejemplo, la
determinación de variantes parte de la implementación de esta metodología de PCR o del RT-PCR,
para el caso del virus con genoma RNA. Después de la exposición de los genes o fragmentos am-
plificados a las enzimas de restricción generan los RFLPs o fragmentos de restricción de longitud
polimórfica. Esta metodología es ampliamente conocida dentro de la biología molecular y ha sido
implementada con éxito en cítricos (Adler, 2014) y para la estimación de variantes de campo del
virus del amurallamiento de venas de la hoja de papa (PYVV)
De otra parte, si los productos de PCR se hacen migrar en geles de poliacrilamida en condiciones
desnaturalizantes, la migración desigual de las cadenas hermanas se podrá determinar fácilmente
por patrones específicos, con la técnica conocida por SSCP (polimorfismo conformacional de cade-
na sencilla). Ambas técnicas permiten mutaciones de tipo puntual (Guzmán, 2004 ).
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