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Análisis de ARN de doble cadena.
Cuando una planta se encuentra infectada por
virus cuyo genoma es de ARN de cadena sen-
cilla (ARNcs también conocido como ssRNA
siglas en inglés), segmentos de cadena doble
(ARNcd también dsRNA siglas en inglés), o por
viroides, en los tejidos afectados hay formación
de ARN de doble cadena, cuya detección es
de utilidad en el diagnóstico.
*
Hibridación de ácidos nucleicos.
Es un procedimiento que incluye cuatro etapas:
sensibilización, hibridación, autografía y revelado.
El método se basa en que los ácidos nucleicos
(ADN y ARN) se pueden desnaturalizar y volver a
unir en cadenas complementarias, bajo condicio-
nes adecuadas; por cuanto están constituidos por
bases púricas (adenina y guanina) y pirimídicas
(citosina, timina en el DNA y Uracilo en el lugar
de tiamina ARN) apareadas complementariamen-
te (guanina con citosina y adenina con timina o
uracilo) por enlaces débiles.
La desnaturalización consiste en la separación
de las cadenas, y la renaturalización en el proce-
so mediante el cual se forma nuevamente la do-
ble cadena por apareamiento de bases. Cuando
dos ácidos nucleicos de diferentes fuentes se
juntan la reacción se denomina hibridación. Para
utilizar el método en el diagnóstico de los virus,
se forma una doble cadena hibrida entre el ácido
nucleico derivado del ARN o del ADN viral debi-
damente marcado que se utiliza como una sonda
(Pineda, 2015).
La técnica se emplea en las primeras etapas
de estudio de una enfermedad cuando no se
conoce con precisión la identidad del agente
causal o cuando se conoce, pero no se dispo-
ne de otros métodos de detección. El procesa-
miento incluye la extracción de los ARNcd y el
análisis por electroforesis en geles de agarosa
o poliacrilamida . (Adler, 2014, 2015).