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ELABORACIÓN POR ELECTROSPINNING DE NANOFIBRAS DE LUPEOL EXTRAÍDO DE
UVA DE MAR (Coccoloba uvifera L.): FACTIBILIDAD, CARACTERIZACIÓN Y
EVALUACIÓN DEL EFECTO ANTIINFLAMATORIO in vitro e in vivo.
Presenta: M.C.A Carla Norma Cruz Salas
Director: Dr. Juan Arturo Ragazzo Sánchez
Co-asesor: Dra. Montserrat Calderón Santoyo
Fecha: 12 de diciembre de 2018
Doctorado en Ciencias en Alimentos Seminario de Protocolo
Las fuentes de obtención de compuestos de alto valor biológico (CAVB) de origen vegetal generan gran
expectativa debido a sus características y propiedades farmacológicas, antimicrobianas y antioxidantes, en
beneficio de la salud humana. Por ello la importancia de estudiar especies vegetales con alto contenido de
estos compuestos. Investigaciones recientes, han demostrado que la hoja del árbol de la uva de mar
(Coccoloba uvifera L.) es una buena fuente de obtención de compuestos triterpenicos, destacando el lupeol,
a y b-amirina 1 , mismos que son reconocidos por sus propiedades biológicas como antiinflamatoria,
anticancerígena y gastroprotectiva. Así mismo, se ha demostrado que la técnica de extracción asistida por
ultrasonido (US), presenta mayores rendimientos en la obtención de estos compuestos. Sin embargo, los
triterpenos, a pesar de ser estables a las condiciones ambientales, como humedad, radiación UV, cambios
de temperatura, etc., requieren en complemento a su extracción, el desarrollo de estrategias que permitan
controlar su liberación para eficientar su efectividad, al ser consumidos o administrados, por lo que surge
la necesidad de su encapsulación mediante procesos novedosos como electrospinning.
El objetivo de la presente investigación es evaluar el efecto antiinflamatorio de nanofibras con lupeol
extraído de la hoja la uva de mar (Coccoloba uvifera L.) elaboradas por el proceso de electrospinning.
El extracto de compuestos triterpenicos se obtendrá de la hoja de uva de mar (Coccoloba uvifera L.)
mediante la técnica de extracción asistida por ultrasonido (42 kHz, 30 min), la preparación de las soluciones
poliméricas se realizará con formulaciones de gelatina tipo B, fructanos de agave de alto grado de
polimerización (FAA) y zeína; en base al diseño de mezclas, evaluando los parámetros de viscosidad,
tensión superficial y conductividad para la determinación de la estabilidad de las soluciones y su capacidad
de ser sometidos al proceso de electrospinning. El proceso de electrospinning para la obtención de
nanofibras se realizará en un equipo Fluidnatek LE-10 del laboratorio Bioinicia and Fluidnatek, con cada
uno de los tratamientos establecidos, ajustando los parámetros del como voltaje del inyector (0-30 kV),
distancia del inyector al colector (1-30cm), rotación del colector (200-2000rpm), flujos desde 5 µL/h y
movimiento del inyector de izquierda a derecha en relación al colector; con el objetivo de estabilizar las
soluciones para el proceso. La determinación del diámetro y morfología de las nanofibras obtenidas se
realizará por microscopia electrónica de barrido con un equipo SEM- Hitachi-S-4800, con voltaje de
aceleración de 10 kV. Se realizará el análisis térmico de las nanofibras mediante termogravimetría y
calorimetría diferencial de barrido (TGA y DSC) que nos permitirán conocer el rango de estabilidad térmica
de los materiales obtenidos, así como las variaciones de masa, temperatura de descomposición y energía
de activación de estos, con lo anterior se determinará las condiciones de almacenamiento y sugerencias
de aplicación. El contenido de lupeol, a y b-amirina se determinará por cromatografía liquida (HPLC). La
eficiencia de encapsulación se obtendrá mediante el uso de la relación de la cantidad de extracto
usado/cantidad de extracto en la muestra, expresado en porcentaje 2 . El análisis de efecto antiinflamatorio
in vitro se realizará con un kit de inhibición de cox-2, el análisis in vivo se realizará mediante el método del
edema auricular usando xilol como agente inflamatorio. Las nanofibras obtenidas, se incorporarán a la
superficie de contacto de un sistema transdérmico que permita su uso con fines terapéuticos.
Con el desarrollo de la presente investigación se espera obtener nanofibras a base de polímeros naturales
que permitan la encapsulación del extracto obtenido de la uva de mar, con la finalidad de evaluar su
efectividad en la disminución de un proceso inflamatorio in vitro e in vivo, para finalmente incorporarlas a
material de curación en beneficio de la salud humana.
1.- Ramos-Hernandez J A, Calderón-Santoyo M, Navarro-Acuña A, Barros-Castillo J C and Ragazzo-Sanchez J A. 2018. Use of emerging technologies in
the extraction of lupeol, α-amyrin and β-amyrin from sea grape (Coccoloba uvifera L.). Journal Food Science Technologie. https://doi.org/10.1007/s13197-
018-3152-8
2.- Chairez- Ramírez M.H, Sánchez Burgos J.A, Gomes C., Moreno- Jiménez M.R, González- Laredo R.F, Bernad- Bernad M.J, Medina- Torres L, Ramírez-
Mares M.V, Gallegos- Infante J.A, Rocha-Guzmán N.E. 2009. Morphological and reléase characterization of nanoparticles formulated with poly (DL- lactide-
co-glycolide) (PLGA) and lupeol: In vitro permeability and modulator effect on NF-KB in Caco-2 cell system stimulated with TNF-α. Food and Chemical
Toxicology. (85) 2-9.