El estudio de un experimento bidimensional homonuclear COSY, así como experimentos bidimensionales heteronucleares (HSQC y HMBC), nos permitió situar los grupos funcionales en la molécula de forma inequívoca. En primer lugar, en el experimento HMBC (ver Figura 9) podemos destacar las correlaciones entre los metilos 23 y 24 a 0.80 y 1.01 δH, respectivamente, con un hidroxilo a 79.0 δC; un carbono cuaternario a 38.9 δC (C4) y un carbono metínico a 55.3 δC (C5), lo que confirma la presencia del grupo hidroxilo sobre el carbono C3. Por otra parte, se observa la correlación del metilo a 1.74 δH (CH3-30) con los carbonos vinílicos situados 150.4 δC (C20) y 109.7 δC (C29), corroborando la estructura del grupo isopropilideno en el esqueleto de lupano. La correlación de los protones H-18 (1.65 δH) y H2-22 (1.50 δH) con un carbono carboxílico a 179.0 δC, situó el ácido carboxílico sobre el carbono C28. Esto permitió asignar la estructura del compuesto 1 como ácido betulínico.
Figura 9. Espectro HMBC (600 MHz) de Compuesto 1 y correlaciones importantes.
Tabla 2. Datos RMN-1H (500 MHz) y 13C (600 MHz) del Compuesto 1 en CDCl3.
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