ПОВОЛЖСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК 1( 28)’ 2017
при-20 ° С, центрифугировали и в супернатанте определяли содержание проурокиназы, урокиназы, протромбокиназы, тромбокиназы( uPA-АГ, uPA-акт, tPA-АГ, tPA-акт), а также их ингибитора PAI-1( PAI-1-АГ и PAI-1- акт) и плазмина, связанного с α 2
-антиплазмином( РАР) методами ИФА( Technoclonе, Австрия). Содержание плазминогена( ПГ) и свободного плазмина( П) определяли спектрофотометрическим методом. Результаты пересчитывали на 1 мг влажной ткани, статистическую обработку осуществляли с помощью сертифицированной программы Statistica 10, достоверность различий определяли, используя t-критерий Стьюдента. Различия считали значимыми при р < 0,05.
Результаты и обсуждение
Установлено, что наибольшим содержание ПГ было в контрольной условно здоровой ткани яичников при миоме матки, в ткани цистаденомы оно снижено в 1,7 раза, в тканях цистаденокарциномы— на 5,2- 13,1 раз на разных стадиях развития, относительно контроля( табл. 1). Только при T 2
N 0
M 0 его содержание выше в 2,5 раза, чем при T 1
N 0
M 0
, но это ниже, чем в контроле и ткани цистаденомы в 5,2 и 3 раза, соответственно.
На всех стадиях рака яичников приходилось констатировать истощение тканевого ПГ: коэффициент соотношения « предшественник / фермент » ПГ / П был 0,1-0,2 против 1,8 в контроле. D. Butera et al. [ 4 ] объясняют снижение ПГ плазмы крови расходом на образование ангиостатина и считают ПГ прямым его прекурсором. Возможно, это объяснение применимо и для тканевого плазминогена, т. к. он является единственным источником ангиостатина. Тем не менее, нарушение физиологического равновесия ПГ и П в ткани на всех стадиях развития рака яичников неблагоприятно сказывается на активности смежных ферментных систем, стабильности межклеточного матрикса и может прямо способствовать злокачественной прогрессии [ 8, 9 ]. Особенно активно происходило образование тканевого плазмина при T 2
N 0
M 0
. Коэффициенты соотношений ПГ / П и ПГ / РАР при раке на всех его стадиях на порядок ниже, чем в ткани цистаденомы, хотя в последней они в 1,8 и в 3 раза, соответственно, ниже контроля( табл. 1).
По содержанию плазмина, связанного с α 2
- антиплазмином( РАР), можно судить как о количестве связанного фермента, так и о содержании ингибитора. При T 1
N 0
M 0 в непораженном яичнике и при T 4
N x-1
M 0 количество образовавшегося комплекса практически совпадало с содержанием РАР в контрольной ткани, а при T 1
N 0
M 0 в пораженном яичнике, T 2
N 0
M 0 и T 3
N x
M 0 было повышено, в среднем в 1,7 раза во всех случаях. При этом активность свободного П повышалась от
T 1
N 0
M 0
( в ткани пораженного яичника) к T 2
N 0
M 0
— это была максимальная величина из всех определенных случаев. В тканях T 3
N x
M 0 и T 4
N x-1
M 0 активность П сопоставима с таковой в контроле и цистаденоме. Плазмин, находящийся в связанном с фибрином и / или клеточными мембранами состоянии, гораздо меньше подвержен ингибированию α 2
-антиплазмином: эффективность его инактивации уменьшается в 430 раз и, соответственно, многократно увеличивается время его полужизни [ 14 ].
При сравнении количества свободного и связанного плазмина в исследованных тканях яичников обращает на себя внимание постепенное нарастание активности свободного плазмина в злокачественно измененной ткани с одновременным истощением количества предшественника и, как следствие,— понижением активности свободного фермента при T 3
N х
M 0 и T 4
N х-1
M 0
( табл. 1). Количество РАР, напротив, оказалось относительно стабильным во всех тканях с небольшими, иногда достоверными колебаниями. Это отражено коэффициентом соотношения двух форм плазмина П / РАР в таблице 1. В цистаденоме невысокое содержание свободного плазмина с преобладанием связанной формы РАР может свидетельствовать о защитной протеолитической реакции, связанной с реализацией санирующих и биологических свойств плазмина в межклеточных пространствах и мобилизацией α 2
-антиплазмина. В цистаденокарциноме, на стадии T 1
N 0
M 0
, в непораженном яичнике наблюдался его дефицит, относительно контрольной ткани, мы считаем возможным перераспределение фракций этого ингибитора в пораженный яичник для блокирования освобождающегося фермента. Отсутствие повышения концентрации α 2
-антиплазмина( комплекса РАР в табл. 1) при росте активности свободного плазмина может быть связано и с токсическим влиянием злокачественной опухоли [ 20 ]. Авторы исследовали нарушение стабильности легочной ткани после лобэктомии и зафиксировали снижение уровня комплекса РАР в плевральном выпоте, повышение активности противосвертывающей системы у больных с нарушенной целостностью альвеолярных структур. На основании полученных данных F. Shoji et al. [ 20 ] пришли к выводу о недостаточности α 2
-антиплазмина и участии плазмина в продолжающемся послеоперационном повреждении альвеолярной ткани больных после лобэктомии.
О. И. Кит и соавт. Система фибринолиза в цистаденоме и на разных стадиях развития цистаденокарциномы яичников 43