Revista virología UNAD 2018 Paso 3. Principales métodos de diagnóstico molecul | Página 6

Diagnóstico molecular: Una de las técnicas moleculares utilizadas para diagnóstico de virus es: RT-PCR (Reverso transcripción seguida por la reacción en cadena de la polimerasa): Técnica que se utiliza para la detección y amplificación de ARN. Permite estudiar la expresión de determinados genes (su traducción a proteínas). En primer lugar, se extrae el ARNtotal de las células en estudio y se separa la fracción correspondiente al mensajero (ARNm). Tras purificarlo el ARN se transcribe a ADN mediante una transcriptasa inversa, por cada molécula de ARNm se sintetiza una molécula de cADN monocatenaria que posteriormente se ha de convertir en bicatenaria utilizando un ADN polimerasa (la rTth ADN polimerasa. A partir de aquí se aplica la técnica de PCR lo que permite una detección de la expresión de ARNm mucho más sensible (Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 1999). 6