Revista de Medicina Veterinaria Revista Medicina Veterinaria Nº3 | Page 44

directrices sobre extracción de sangre estandarizó el color, fórmula y recomendaciones para cada uno de los distintos elementos utilizados en laboratorio clínico (Anexo 3) (Organización Mundial de la Salud, 2010). coagulación, sin embargo, no entendía el mecanismo. Más tarde se descubrió que el efecto se debía a la afinidad del calcio con el ácido cítrico. Posteriormente se supo que el citrato, en una dosis de aproximadamente 1,7 g/L de sangre de perro, previene la coagulación al reducir la concentración de calcio por debajo del mínimo necesario para la coagulación. En 1943 se señaló que con la solución de citrato de sodio se obtuvo más glucosa en la muestra, la concentración de citrato en la mezcla de plasma con diluyente era bastante superior a 20 mmol/L, sin embargo, la aparición de coágulos ocasionales era todavía un problema (Mollison, 2000). Finalmente se estableció que al utilizar citrato de sodio al 3.8% no se producen coágulos ocasionales y se logra una completa precipitación del calcio (Mollison, 2000). Fluoruro de sodio/oxalato (tapón gris claro): Según Bender y Mayes (2013), el fluoruro de sodio, actúa como inhibidor de la glucólisis mediante la formación del complejo fluorfosfato de magnesio e inhibe la enolasa, enzima que cataliza una deshidratación formando fosfoenolpiruvato y de esta forma detiene el Ciclo de krebs. En la actualidad se sabe que el fluoruro de sodio desde las cuatro horas cumple su rol inhibidor de glucólisis y estabiliza el nivel de glucosa en sangre, el cual se mantiene hasta 72 horas a temperatura ambiente. En suero separado, no hemolizado y estéril sin fluoruro la concentración de glucosa es estable por 8 horas a 25°C y 72 horas a 4°C (Sacks et al., 2011). Sin embargo, dado que la estabilización de la glucosa ocurre recién a las 4 horas después de la recolección de la muestra, durante las primeras horas la concentración de glucosa en plasma disminuye y la concentración es similar a la de los tubos sin fluoruro de sodio. Según Mussart (2010), se recomienda usar citrato trisódico (3.8%) para uso in vivo o in vitro el que actúa formando un complejo con el calcio (quelante) e interfiriendo la acción de la protrombina. Es útil para determinar tiempos de protrombina, tiempo de tromboplastina parcial activada (KPTT) y fibrinógeno, así como también para efectuar recuento de plaquetas y eritrosedimentación. La perdurabilidad de la inhibición de la glucólisis por disminución de pH en la muestra de sangre se estima en 8 horas, manteniéndola a 4-5°C. También es ampliamente utilizado como anticoagulante base para sangre destinada a transfusión. Adicionalmente, los tubos con fluoruro de sodio son inapropiados para medir otras sustancias como Na+, K+ y enzimas (Bowen y Remaley, 2014). Heparina (tapón verde oscuro): Como anticoagulante opera bloqueando el paso de protrombina a trombina (potencia la acción de la antitrombina III). También inhibe los factores VII, IXa, Xa y XIa, además ejerce acciones como anti-agregante plaquetario. La perdurabilidad de la muestra de sangre sin coagular es de 10-12 horas ya que no evita la coagulación, solamente la retrasa unas 12 horas (Wiener laboratorios S.A.I.C., 2000). El oxalato de potasio que se adiciona junto con el fluoruro de sodio al tubo de tapa gris y actúa como anticoagulante. Su acción se basa en la fijación del calcio y así detienen la cascada de coagulación. Se utiliza 0.01ml de una solución al 30 % para cada mL de sangre (Garófalo y Yépez, 2013). Citrato sódico (tapón celeste): La concentración recomendada de anticoagulante es de 10uL por mL de sangre (Mussart, 2010). debido a que en dosis más altas la heparina cataliza la inactivación de la trombina por un segundo cofactor de plasma, cofactor II de heparina (Instituto Químico Biológico, 2012). Una En 1890 se concluyó que las sales de calcio eran absolutamente necesarias para la coagulación. Posteriormente, Griesbach en 1891 (citado por Mollison, 2000) afirmó que el citrato de amonio interfiere con la 43