Revista de Medicina Veterinaria e Investigación Revista Medicina Veterinaria e Investigación N°2 | Page 23

La apariencia y cantidad de las células del cumulus,
que rodean al ovocito, está relacionada con la
capacidad del ovocito de reanudar la meiosis, ser
fecundado y desarrollarse hasta el estado de
blastocisto.
Estas células tienen
procesos
citoplasmáticos que penetran a través de la zona
pelúcida y membrana del ovocito, a través de estas
uniones Gap Juntions hay transferencia de moléculas
de pequeño peso molecular entre el ovocito y las
células del cumulus, iones, metabolitos y aminoácidos
necesarios para el crecimiento del ovocito y otras
moléculas que regulan su desarrollo (Gilchrist et al.,
2004; Gilchrist y Thompson, 2007).
Introducción
Las técnicas de reproducción asistida, relacionadas
con espermatozoides, ovocitos o embriones, no sólo
adquieren importancia para la multiplicación y mejora
genética de los animales de granja o como alternativa
para la reproducción en infertilidad humana, sino que
además han ido ganando terreno en la reproducción
de especies como felinos en cautiverio y para
preservar la diversidad de material genético existente
(Bristol-Gould y Woodruff, 2006; Waurich et al. 2010;
Pope, 2014).
La familia Felidae que está compuesta por 37
especies, el gato doméstico (Felis catus) es la única
que no se encuentra en peligro de extinción o
amenazada (Bristol-Gould y Woodruff, 2006). Debido
a esto, los gatos, se han utilizado como modelo
experimental para el desarrollo de las biotecnologías
reproductivas en felinos silvestres (Franzosi et al.
2003). En nuestro país existen 5 especies de felinos
silvestres; el Gato andino (Leopardus jacobita) y el
Gato guiña (Leopardus guigna) en peligro de
extinción, el Gato colocolo (Leopardus colocolo) y el
Gato geoffroy (Leopardus geoffroy) clasificados como
casi amenazado y el Puma (Puma concolor) en
categoría de preocupación menor según la IUCN
(International Union Conservation of Nature).
Establecer protocolos de colecta de ovocitos y
espermatozoides y su preservación o uso en
fecundación in vitro para obtener nuevos individuos
puede ser de ayuda para conservación de estos felinos
silvestres.
En general los ovocitos maduros in vivo o in vitro han
sido utilizados principalmente para producir
embriones luego de fecundación in vitro (FIV)
(Donoghue et al. 1990; Kanda et al. 1998, Pope, 2014),
para ser congelados a través congelación
convencional (Luvoni, 2006) o bien vitrificación
(Mikolewska et al. 2012; Pope et al. 2012; Calvo et al.
2015), finalmente han sido también utilizados para su
uso en Clonación (Yin et al. 2008). Para colectar
ovocitos maduros, las hembras son tratadas
previamente con gonadotrofinas para inducir el
crecimiento y maduración folicular, luego la colecta
de estos ovocitos se realiza aproximadamente 23 a 24
horas de la inducción de la ovulación a través de
laparoscopia o laparotomía y punción directa de los
folículos maduros de más de 2 mm, obteniendo
alrededor del 90% de ovocitos en estado de metafase
II (Donoghue et al., 1990; Kanda et al. 1998; Pope,
2014). En tanto que el método a elección para colectar
ovocitos inmaduros in vitro, en felinos, es a través del
corte del ovario en pequeños trozos sobre una placa
de Petri, para que de esta forma sean liberados de los
CCOs (Comizzoli et al. 2006; Pope et al. 2012; Calvo et
al. 2015). El método de punción y aspirado del ovario
in vitro, se realiza con poca frecuencia en esta especie,
a diferencia de lo que sucede con otras como porcinos
(Fernández et al. 2010; Lorenzo et al. 2015), bovinos
(González et al. 1992; Hernández et al. 2010), búfalos
(Quintana et al. 2012) y llamas y alpacas (Vásquez et
al. 2015), donde la punción y aspirado se realiza en los
folículos dentro de un rango de tamaño determinado
para la especie, usualmente 2 a 8 mm de diámetro, en
felinos se realiza puncionando y aspirando la corteza
ovárica, debido a que los folículos son de un diámetro
mucho menor al de las especies mencionadas. De la
bibliografía consultada sólo uno en felinos utilizó esta
forma de colección de ovocitos (Luvoni et al. 2006).
De los ovarios podemos obtener ovocitos maduros o
inmaduros, ambos tipos rodeados por células
foliculares conocidas como células del cumulus,
formando el complejo cúmulos ovocito (CCO). Los
ovocitos maduros presentan el cumulus expandido y
al estar en la metafase de la segunda meiosis
(Metafase II), presentan en el espacio perivitelino el
primer corpúsculo polar (Sirard et al. 2006). Los
ovocitos inmaduros se encontrarán en la profase de la
primera meiosis, son ovocitos rodeados de una densa
y compacta masa de células de cúmulos y con un
citoplasma oscuro debido a una gran cantidad de
lípidos (Franzosi y col 2003; Luvoni, 2006). Los
ovocitos inmaduros deben ser incubados y madurar in
vitro antes de ser utilizados para obtener embriones
luego de fecundación y cultivo in vitro (Comizzoli et al.
2006; Sananmuang et al. 2010; Luu et al. 2013; Ochota
et al. 2016; Ochota y Nizanski, 2017).
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