Revista de Medicina Veterinaria e Investigación Revista Medicina Veterinaria e Investigación N°2 | Page 25

puede deberse a la mayor experiencia o mayor presión en cuanto a la selección de CCOs, sin embargo, ambos resultados son muy inferiores a los resultados obtenidos por Calvo et al. (2015), quienes reportaron la obtención de 15,39 CCOs grado I y II por ovario utilizando la técnica de corte, ellos reportaron que el trabajo se realizó con gatas en la etapa reproductiva o fase folicular, nuestro estudio se realizó en otoño y de acuerdo a las estructuras encontradas en los ovarios y a la citología vaginal realizada en las gatas al momento de la cirugía, sólo 5 de 9 gatas se encontraban ciclando. Resultados De los 28 ovarios fueron colectados 584 CCOs en total. Con el método de aspiración se obtuvieron 262 CCOs, un promedio de 18,85 CCOs/ovario y con el método de corte se obtuvieron un total de 322 CCOs con un promedio de 23,0 CCOs/ovario (tabla I y II). Se obtuvieron 3,07 y 7,21 ovocitos por ovario aptos para ser madurados in vitro con el método de punción y aspiración de la corteza ovárica y con el método del corte del ovario respectivamente. Estos valores son estadísticamente significativos. Con el método de aspiración se obtuvieron 18,9 CCOs por ovario y 3,07 CCOs grado I y II, similar a lo obtenido por Luvoni et al. (2006), de 3,34 CCOs grado I y II, utilizando el mismo método de colecta de ovocitos. Discusión Como lo reportado en otras especies, porcinos (Lorenzo et al. 2015), llamas y alpacas (Vásquez et al. 2015), el método de corte entregó mayor cantidad de CCOs que el método de punción y aspirado. En cuanto a la calidad de los CCOs fue, en este estudio, también superior con el método de corte del ovario, lo que difiere a lo publicado en esos trabajos donde la calidad de los CCOs colectados, en porcentaje, no fue diferente entre los métodos, aunque Lorenzo et al. (2015) obtuvieron mayor porcentaje de maduración in vitro en los ovocitos colectados por aspiración (57,5 versus 33,3%). Hay que mencionar que en esos estudios los ovocitos colectados por aspiración folicular provenían de folículos mayores a 2 mm de diámetro en llamas y alpacas (Vásquez et al. 2015) y entre 3 a 8 mm de diámetro folicular en ovarios de cerda (Lorenzo et al. 2015), en tanto el método de corte fue realizado, en ambos estudios, en todo el ovario, lo que significa que con esta última técnica se obtienen ovocitos de folículos antrales que no están sobre o dentro de los rangos de tamaño folicular incluso pueden provenir de folículos no antrales. Por otro lado, Fernandez et al. (2010), con ovarios de cerda, utilizaron ambas técnicas no encontrando diferencias entre la cantidad y calidad de los ovocitos obtenidos ni en el desarrollo embrionario después de FIV, la diferencia con respecto a los estudios anteriores, es que la técnica de aspirado y corte fue dirigida sólo a los folículos de 3 a 5 mm de diámetro, mostrando que el tamaño de los folículos estaría relacionado con la competencia de los ovocitos para ser utilizados en FIV. Con ovarios de gata, Sánchez et al. (2006), obtuvieron por el método de corte 20,79 CCOs por ovario, similar a lo obtenido en este estudio (23 CCOs). Ellos obtuvieron 3,54 ovocitos de categoría I y II para ser madurados in vitro, inferior a los 7,6 CCOs grado I y II obtenidos en este estudio, esto Se ha reportado que, por el método de corte, se obtendría CCOs de folículos antrales y no antrales, diferente a lo que podría pasar con el método de aspirado, esto es importante ya que se sabe que los CCOs de folículos antrales son los que poseen la capacidad de desarrollarse a embriones después de maduración y fecundación in vitro convencionales (Bristol-Goud y Woodruff, 2006). Lorenzo et al. (2015), reportaron que los ovocitos de folículos no antrales o antrales pequeños, la calidad de los ovocitos resultó variable y muchos de ellos no fueron competentes para desarrollarse in vitro. Una de características que podría ayudar a la selección de ovocitos originados de folículos antrales, podría ser la medición del diámetro del ovocito, el que estaría relacionado al tamaño folicular, lo que a su vez se ha asociado con la competencia meiótica y el desarrollo potencial de estos ovocitos a embriones (Lorenzo et al. 2015). En gatos, Luvoni et al. (2006) seleccionaron en base a apariencia del citoplasma del ovocito y número de capas de células del cumulus y su compactación, pero además ovocitos mayores a 100 µm de diámetro. Bristol-Gould y Woodruff (2006), describieron que los ovocitos crecen desde 20 a 30 µm de diámetro, en un folículo primordial, a 80 a 100 µm de diámetro, en un folículo antral, de 2 a 3 mm de diámetro en la gata. En nuestro estudio, si bien no fueron medidos los diámetros de los folículos observados, sólo en 6 de 14 ovarios (20 folículos) fueron registrados folículos visibles (antrales) en el grupo de ovarios que fueron sometidos a aspiración y en 3 de 14 ovarios (12 folículos) que fueron sometidos a la técnica de corte, lo que significa que la mayoría de 24