8
BÖLÜM 1
ŞEKİL 1–6
■
Histoloji ve Çalışma Yöntemleri
Konfokal mikroskobun çalışma ilkesi.
Bir kesit düzleminden gelen küçük noktasal bir ışık iğne deliğinden geçip algılayıcıya ulaşsa da, diğer düzlemlerden gelen ışık
demetleri bir perdeyle engellenir. Böylece, bir kerede çok ince
bir düzlem odaklanır. Çizimde konfokal mikroskobunun basit
şeması gösterilmektedir. Bir lazer kaynağından gelen ışık örneğe
çarpar ve yansıtılır. Bir ışın ayırıcı yansıyan ışığı, iğne deliğine ve
algılayıcıya yönlendirir. Örneğin aşağı ve yukarı odak düzlemlerindeki bileşenlerinden gelen ışık bir perde ile bloklanır. Lazer örneği tarar ve böylece örneğe ait daha geniş alanlar incelenebilir.
pozlanırlar. Örneğin bir ucundan bir ucuna, bir seri odak düzlemi üzerinde bu optik bölümlerin oluşturulması, görüntünün
dijital olarak 3D yapısının yeniden inşasına olanak verir.
Polarize (Kutuplaştırıcı) Işık Mikroskobu
Polarize ışık mikroskobu iyi organize olmuş altbirimlerden
yapılı boyanmış ya da boyanmamış yapıların tanınmasına
olanak sağlar. Normal ışığın polarize filtrelerin içerisinden
geçişi yalnızca tek bir doğrultuda bir titreşim meydana getirir.
Eğer mikroskopta birinci filtrenin üzerine, ana ekseni birinci
filtrenin eksenine dik olacak şekilde ikinci bir filtre konulursa,
hiç ışık geçemez. Yönelimli makromoleküller içeren doku yapısı eğer iki polarize (kutuplaşmış) filtre arasına yerleştirilirse,
bunların tekrarlayıcı yapısı kutuplaştırıcıdan çıkan ışığın eksenini döndürür ve bu yapılar karanlık bir arka plan üzerinde
ŞEKİL 1–7 Aydınlık alan ve polarize ışık
mikroskoplarında dokunun görünüşü.
Polarize ışık mikroskobu sadece tekrarlara sahip malzeme ve
periyodik makromoleküler yapıların bir görüntüsünü oluşturabilir; bu gibi yapılardan yoksun özellikler görünemez. Lam
üzerine alınan ince ve kesilmemiş mezenter parçaları kırmızı
pikrosiryus, orsein ve hematoksilen ile boyanmış ve aydınlık
alan (a) ve polarize (b) mikroskoplarla incelenmiştir.
(a) Aydınlık-alan mikroskobu ile birlikte k